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小型實驗室
小型實驗室Bento Lab是一個便攜式移動基因組學設置。配備有熱循環器(1)、微型離心機(2)、藍色LED透射儀(3)、凝膠電泳儀(4)系統操作使用一個直觀的車載圖形界面(5),并配備一個方便的管架(6)。它是一(yi)個專業(ye)的實驗室設(she)(she)備,雖然它也用(yong)于(yu)教育設(she)(she)置,但它不是一(yi)個玩具。在使用(yong)本(ben)設(she)(she)備之(zhi)前(qian),請(qing)仔細閱(yue)讀(du)本(ben)手冊,特別(bie)是關于(yu)安全的章節。
Bento Lab
是一個便攜式移動基因組學設置。配備有熱循環器(1)、微型離心機(2)、藍色LED透射儀(3)、凝膠電泳儀(4)
系統操作使用一個直觀的車載圖形界面(5),并配備一個方便的管架(6)。
它是一個專業的實驗室設備,雖然它也用于教育設置,但它不是一個玩具。在使用本設備之前,請仔細閱讀本手冊,特別是關于安全的章節。
小型實驗室
物理(li)描述(shu)拆包和維(wei)修
BENTO LAB實驗(yan)室用戶手(shou)冊的(de)這一章(zhang)描述了BENTO LAB實驗(yan)室的(de)主(zhu)要物(wu)理特性,以及關于安裝(zhuang)的(de)說(shuo)明(ming)。
接口
BENTO LAB實驗(yan)室用(yong)戶(hu)界面概(gai)述。解(jie)釋(shi)每個按(an)鈕的(de)功能,以及用(yong)于操作(zuo)設備的(de)圖形用(yong)戶(hu)界面上(shang)的(de)常(chang)用(yong)元素。
離心(xin)機
BENTO LAB實驗(yan)室(shi)離心(xin)機模塊的用戶手冊章(zhang)節(jie),包(bao)括(kuo)物理(li)規范、操作指(zhi)南、安全和平衡方面的信息。
離心機(ji)
凝膠電泳和(he)透照(zhao)儀(yi)
BENTO LAB實驗室凝膠電泳(yong)和透照器模塊的用(yong)戶手冊章(zhang)節。包括(kuo)一個物理規格,關于鑄造(zao)凝膠和連(lian)接(jie)凝膠盒(he)的信息,和操作指 南 的接(jie)口。
凝膠電泳/熒光(guang)PCR /熱(re)循環/加(jia)熱(re)塊
本用戶指(zhi)南包含充(chong)分利用BENTO LAB實驗室的(de)熱循環和(he)熱阻模塊所需的(de)所有(you)信息(xi),包括創建和(he)存儲新的(de)協議(yi)。
安全和實踐
BENTO LAB實驗室用戶手(shou)冊的基本安(an)(an)全建議章節。安(an)(an)全標志說明、維護說明、技術(shu)規范和警告。
安全
章物理描(miao)述(shu)、拆包和(he)維修
BENTO LAB實驗(yan)室(shi)用戶手冊的這一章描(miao)述了便(bian)當實驗(yan)室(shi)的主要物理特性,以(yi)及關于安裝的說明。
Bento Lab包(bao)括熱循環模塊(1)、微離心機(2)、藍(lan)色LED透(tou)射儀(yi)(3)和與(yu)外部凝膠電(dian)泳(yong)容器(4)一起使用的凝膠電(dian)泳(yong)電(dian)源(4)。
系統操(cao)作(zuo)使用一個直觀(guan)的車載圖形界面(5),并配備一個方便的管架(6)。
容(rong)界面區域
物(wu)理描述-側(ce)拆包裝和檢(jian)驗
維修故障(zhang)排除
界面(mian)面(mian)積
實驗(yan)室(shi)有三個物理按(an)(an)鈕(niu)。屏(ping)幕下的(de)藍色(se)圓(yuan)形按(an)(an)鈕(niu)(1)是(shi)HOME按(an)(an)鈕(niu),它總是(shi)將(jiang)(jiang)用戶帶回到概覽屏(ping)幕,從那里(li)可以選擇所(suo)有不同的(de)模(mo)塊。箭頭形狀的(de)綠色(se)按(an)(an)鈕(niu)(2)是(shi)后(hou)退(tui)按(an)(an)鈕(niu),根據上下文將(jiang)(jiang)用戶后(hou)退(tui)一步或撤消操作。此外,還有一個橙色(se)的(de)單(dan)擊撥號(3),用于選擇屏(ping)幕上的(de)元素(su)并(bing)更改(gai)值。
有關用戶(hu)界面(mian)如何工作的更多信息(xi),請參閱(yue)手冊的下一章。
物理(li)描述-側面(mian)
在后面,實驗室有一(yi)個4針電源連接器(1)和一(yi)個物理(li)電源開關(2)。
在右邊(bian),實驗室有(you)通風口,用(yong)于主動冷(leng)卻熱循環器的散(san)熱器風扇。
在左側,實驗(yan)室有紅(hong)色(se)和黑色(se)的(de)凝(ning)膠電泳電源連接器(qi)
實驗室(shi)凝膠電泳盒的(de)所有部(bu)分
凝(ning)膠盒插在實驗室的一側。電流通(tong)過時,指示(shi)燈(deng)亮(liang)。
Bento Lab配備(bei)了一(yi)個(ge)(ge)(ge)外部凝(ning)膠電泳(yong)容器,其中有兩(liang)個(ge)(ge)(ge)橡膠壩,用于在澆鑄過程中創建緩沖帶,一(yi)個(ge)(ge)(ge)9孔(kong)梳和一(yi)個(ge)(ge)(ge)12孔(kong)梳。凝(ning)膠電泳(yong)的電流通過連接到實驗室凝(ning)膠電泳(yong)電源的蓋子。這個(ge)(ge)(ge)蓋子也可以作(zuo)為(wei)藍色的濾光(guang)片(pian)
光透照器(qi)。為(wei)實驗室(shi)提供外部(bu)電源。開箱檢查 小心地打開包(bao)(bao)裝,確保實驗室(shi),包(bao)(bao)括管架和凝(ning)膠盒,電源供應。如果設備出現任何損(sun)壞,請(qing)與我們聯系,請(qing)保留包(bao)(bao)裝,以(yi)返回設備進行維(wei)修。
實驗室的包(bao)裝-保(bao)留(liu)包(bao)裝,返回服(fu)務設備三個橙色絲(si)帶附(fu)在(zai)便當(dang)實驗室的基礎上,以確保(bao)管架和凝膠盒運輸(shu)時。它們可(ke)以通過(guo)固定在(zai)相反的腳(jiao)周圍來(lai)儲存。
如上(shang)圖所(suo)示,將橙色絲(si)帶(dai)拉到(dao)另一只腳上(shang),就可(ke)以很容易地(di)將絲(si)帶(dai)儲存(cun)起來。
確保(bao)BENTO LAB放(fang)在一個堅實的,水(shui)平的表面,這是能夠支持其重量(liang)。
維修
實(shi)驗(yan)室(shi)不(bu)包含用戶可服(fu)(fu)務的(de)(de)部分。將(jiang)所有的(de)(de)維修(xiu)交給合格的(de)(de)服(fu)(fu)務人(ren)員。打開(kai)產(chan)品使保修(xiu)無效。維修(xiu)請聯(lian)系我(wo)們
故(gu)障排(pai)除
如果您(nin)發現(xian)實驗(yan)室有(you)問(wen)題,請(qing)與(yu)我們(men)聯系
第(di)二章(zhang)——界(jie)面
實驗室用(yong)戶界(jie)面概(gai)述。解釋(shi)每(mei)個按(an)鈕(niu)的(de)功能,以及用(yong)于操(cao)作(zuo)設備的(de)圖形用(yong)戶界(jie)面上(shang)的(de)常(chang)用(yong)元素。
實(shi)驗(yan)室有一個液晶顯示器(qi)(1),和(he)三個按(an)鈕。屏(ping)幕(mu)(mu)下(xia)的藍色小按(an)鈕(2)是主按(an)鈕,總(zong)是將用戶帶回(hui)到主屏(ping)幕(mu)(mu)。大而(er)圓(yuan)的橙色按(an)鈕(3)是點擊(ji)撥號,用于(yu)選擇屏(ping)幕(mu)(mu)上的元素。綠色的back按(an)鈕(4)形狀像一個向左(zuo)的箭(jian)頭(tou)。它(ta)用于(yu)返回(hui)接(jie)口中的一個步驟。
內容
主屏(ping)幕
當實(shi)驗室打開時,默認顯示主(zhu)屏幕。從這(zhe)里可以選(xuan)擇各個模(mo)塊(1),當前狀態顯示在狀態區(qu)域(2)。
在下(xia)面的(de)(de)例(li)子中(zhong),PCR圖標(biao)下(xia)的(de)(de)標(biao)志表示PCR程序已(yi)經完成。如(ru)果(guo)一個進程正在運行(如(ru)凝膠電(dian)泳或離(li)心(xin)機(ji)定時器,或PCR運 行),一個倒計時時鐘將是可見的(de)(de)。
另外,Wifi狀(zhuang)態顯示在左(zuo)上角(3)。
可以(yi)(yi)使用橙色的單擊撥(bo)號選(xuan)擇單個模(mo)塊(kuai)。只(zhi)需旋(xuan)轉點(dian)擊撥(bo)號以(yi)(yi)突(tu)出(chu)顯示所需的模(mo)塊(kuai),然后(hou)推動它進入(ru)該模(mo)塊(kuai)的接(jie)口。主屏幕(mu)上的模(mo)塊(kuai)是,從(cong)左到右,凝膠電泳和透照器(qi),離心機,熱循環。
變(bian)化的值
有(you)些按鈕包含可以操作(zuo)的值。這些包括,例如,時間和溫(wen)度值。
要更改按(an)鈕上(shang)的值,先使用橙色的單擊撥號導(dao)航到(dao)該按(an)鈕,以突出(chu)顯示該按(an)鈕。然(ran)后,推動(dong)和按(an)住點擊撥號,同(tong)時(shi)轉(zhuan)動(dong)它(ta)。這將(jiang)調整(zheng)值向上(shang)(順(shun)時(shi)針旋轉(zhuan))或(huo)向下(逆時(shi)針旋轉(zhuan))。釋(shi)放點擊撥號時(shi),將(jiang)設(she)置新(xin)值。
任何(he)按鈕的值(zhi)都(dou)可(ke)以通過(guo)這(zhe)種方式操(cao)作,按鈕的右邊(bian)都(dou)有一個圓形圖(tu)標,顯示向上和向左(zuo)的箭頭(tou)。
第三章——離心機
組件和物理布局
離心機(ji)模(mo)塊明顯地(di)位于(yu)便當實驗室系統的(de)中間。為了確保安全(quan),它配有(you)一個自動(dong)鎖(suo)定的(de)蓋(gai)子(1)。通過蓋(gai)子窗(chuang)口可(ke)以看到微型(xing)離心機(ji)(2)的(de)可(ke)移動(dong)轉(zhuan)子。
離心機的(de)規范
轉子的能力 | 6 x 1.5mL管 |
離心力 | 500 x g |
離心(xin)力 | 8000 x g |
使用(yong)前(qian):平衡
在(zai)(zai)開始使用(yong)離(li)心機(ji)之前,確保(bao)你的樣(yang)品(pin)在(zai)(zai)轉(zhuan)子上是相對放置(zhi)的。
還要檢查你(ni)們的樣(yang)品重(zhong)量是否相同。
永遠不要在不平衡的(de)配(pei)置下運(yun)行離心機(ji),因為這將損(sun)壞設(she)備(bei)。
使用離心(xin)機
要操作(zuo)離心機,請從狀態屏幕中選(xuan)擇該(gai)模(mo)塊。
有(you)兩(liang)種使(shi)用(yong)方式;點動瞬時離心和(he)計時(shi)旋(xuan)轉。點動瞬時(shi)離(li)心用(yong)(yong)于(yu)沒有預先(xian)(xian)定義(yi)時間的(de)短自旋(xuan)。這種模式通常(chang)用(yong)(yong)于(yu)當您需要運行離心(xin)機(ji)數秒(miao),如收集樣品在(zai)管的(de)底部。時間自旋(xuan)用(yong)(yong)于(yu)在(zai)用(yong)(yong)戶定義(yi)的(de)速度(du)下,在(zai)預先(xian)(xian)定義(yi)的(de)時間內旋(xuan)轉。
蓋子必須(xu)關閉,以選擇點動瞬時離(li)心或計時(shi)旋轉。
若要(yao)使用點(dian)動瞬(shun)時離心(xin),請使用橙色單擊(ji)撥號選擇(ze)圓形箭頭按(an)鈕(niu)。按(an)住橙色的(de)點(dian)擊(ji)盤,離(li)心機(ji)就會開(kai)始(shi)旋轉。計數(shu)器將(jiang)記錄離(li)心機(ji)運轉的(de)時間。要停(ting)止離(li)心機(ji),只要松開(kai)按(an)鈕(niu),離(li)心機(ji)就會慢(man)下來
停(ting)止(zhi)(zhi)。電機停(ting)止(zhi)(zhi)后(hou),蓋(gai)子(zi)自(zi)動解鎖,安(an)全(quan)開啟(qi)。等待,直到你聽(ting)到從蓋(gai)子(zi)的(de)點擊,表(biao)明鎖被打開。
若要使用計時旋轉(zhuan)選(xuan)項,請使用橙色單擊撥(bo)號選(xuan)擇時鐘符號。G的力(li)量和定(ding)時器可(ke)以調整推和旋(xuan)轉(zhuan)的橙色點擊撥(bo)號,同時按住(zhu)它(ta)。順時針(zhen)旋(xuan)轉(zhuan)會(hui)增加數值,逆時針(zhen)旋(xuan)轉(zhuan)會(hui)減少數值。單擊confirm按鈕開(kai)始運行。
當離心(xin)(xin)機(ji)帶定時(shi)器運行時(shi),剩余時(shi)間顯示(shi)在(zai)右上角的位置(1),時(shi)鐘按鈕(2)允許調整(zheng)定時(shi)器,取消(xiao)按鈕(3)可以(yi)手動關閉(bi)離心(xin)(xin)機(ji)。
請注意,即使(shi)一(yi)些合適離心機轉速(su)的試管(guan),如果旋轉(zhuan)的速度太(tai)大,可以(yi)破壞離心機,其(qi)中也包括后壁管。
安全建議
實驗前準備
離(li)(li)心機(ji)用(yong)于分離(li)(li)懸浮液和溶(rong)液,并保持在適當的1.5ml內。
只有(you)在你閱讀并理(li)(li)解了說明書(shu)之后才能操(cao)(cao)作離心機(ji)。實驗室負責人有(you)責任確(que)保所(suo)有(you)使(shi)用離心機(ji)的(de)人員都(dou)經過培(pei)訓,并保留完整的(de)培(pei)訓記錄。穿戴(dai)必要的(de)防護(hu)設(she)備,遵(zun)守良好的(de)實驗室操(cao)(cao)作規程,包括樣品和(he)試管的(de)儲存和(he)處(chu)理(li)(li)。
無論您使用何種微生物(wu)、化學物(wu)質或試劑(ji),始終確保您按照供應商的(de)說明和(he)當地及國家(jia)的(de)規(gui)定處理、儲存(cun)和(he)處置材料。
不(bu)要使用BENTO LAB實驗(yan)室,如果(guo)有暴露(lu)的(de)電線,嚴重的(de)機械損傷(shang)或腐蝕的(de)跡象。
注(zhu)意(yi)避免人身傷害,將他人置于危險中,離(li)心(xin)機及其它設(she)備損壞
轉子
轉子的機械故障(zhang)有(you)碎(sui)片飛濺或著火的危險(xian)
在使(shi)用前(qian),目視檢查離心機,確(que)保電力電纜、蓋子和密封件清潔、完好,無電線(xian)外露(lu)。
如果出(chu)現異常情況(噪音或震動),立即停止離心(xin)機。
打開離心機和接觸轉子有皮膚刺激的風險
在操作過程中
轉(zhuan)子仍(reng)在旋轉(zhuan)時,不要打(da)開蓋。不要試(shi)圖用手(shou)使旋轉(zhuan)的轉(zhuan)子減速。
破損(sun)樣管有割傷(shang)和感染的風(feng)險
僅使用(yong)1.5ml或0.2ml的(de)樣管(使用(yong)合適的(de)適(shi)配器),戴保護(hu)手套。
如有(you)漏出,應將(jiang)離心機消(xiao)毒。如有(you)必要,清潔周圍環境。
必要時對(dui)破損的樣管進行消毒和處(chu)理(li)。如果你割傷了(le)自(zi)己,尋(xun)求(qiu)急救。
危險(xian)樣品使用的(de)污染風險(xian)
只有(you)在觀察到相(xiang)關產品上(shang)列出的安全(quan)預防措施(shi)時,才(cai)使用(yong)致病性、毒性或放(fang)射性物(wu)質。
按照實驗(yan)室操作規程處理和處置樣品
在離心過程中樣(yang)品(pin)的(de)不平(ping)衡可能導(dao)致轉子損壞
操作
將樣品均(jun)勻地裝(zhuang)入離(li)心機(ji)。確保它們有(you)相同(tong)的(de)質量。
確保離心機放置在水(shui)平面上。
在離心機附近小心有著火、燃燒危險的(de)操作
可在離心機內點燃(ran)(ran)的易(yi)燃(ran)(ran)或可燃(ran)(ran)蒸汽
在通風(feng)良好的(de)地方工(gong)作
有著火、污染(ran)或樣品泄漏(lou)腐蝕的(de)風險
使用前檢查(cha)樣(yang)品管是否(fou)有裂縫和變(bian)形(xing)。
樣品管禁止填充(chong)大容量。裝入樣(yang)管的材料(liao)必須與樣(yang)管材料(liao)不發生任何(he)化學反應
立即清理泄(xie)漏。對溢出的(de)有害物質(zhi)必須進行充(chong)分的(de)消毒(du),不許留下任何液(ye)體(ti)。離心機(ji)與設(she)備的其余部(bu)分絕緣,因(yin)此不會造成任何短路。
切勿使樣本離心(xin),以免(mian)產生易燃或(huo)易爆氣體。
第(di)四章-凝膠電(dian)泳和投射臺
實(shi)驗室凝(ning)膠(jiao)電泳和(he)反式照明(ming)模塊的(de)(de)用戶手冊章節。包括一(yi)個物(wu)理規格,關于鑄造凝(ning)膠(jiao)和(he)連(lian)接凝(ning)膠(jiao)盒(he)的(de)(de)信息,和(he)操作指南的(de)(de)接口。
內容
·規(gui)格
使(shi)用界面
Casting 凝膠
電(dian)泳緩沖器
我應該使用什(shen)么緩沖器?
TBE 緩沖(chong)
瓊脂糖百分比
我(wo)應該使用(yong)多少百分(fen)比的瓊脂糖?
運行(xing)凝膠
組件和物理布局
凝膠電泳和透照器模塊位于(yu)便當實驗室系統的左(zuo)側。
凝膠(jiao)盒由兩部(bu)分(fen)組成。底座(1)由透明丙烯酸制成。在電泳過程中(zhong),可用于澆鑄(zhu)凝膠(jiao)和作為電泳槽。它(ta)還儲存(cun)鑄造(zao)泳道(dao)和(he)梳子(zi)。蓋子(zi)(2)由橙(cheng)色丙(bing)烯酸(suan)制成,用作藍光透照器(qi)的過濾器(qi)。在實(shi)驗室系統(3)的左(zuo)側,有(you)一(yi)個紅色和(he)黑(hei)色的插座(zuo)
為凝膠電泳提供電流。藍色LED透照(zhao)器(4)位(wei)于(yu)設備(bei)左側。
凝膠盒包(bao)含(han)幾個(ge)部分,包(bao)括橙(cheng)色的蓋子(1)和底座(2),兩(liang)個(ge)用(yong)于在凝膠澆(jiao)鑄(zhu)期間(jian)創建緩沖區(qu)的水壩(3),以及(ji)用(yong)于11和15井凝膠的梳(shu)子(4)。
規(gui)范(fan)
電壓 | 50 v - 120 v |
盒子尺寸 | 91 mm x 78 mm |
可視(shi)化 | 藍(lan)光和擴散(san)器 |
觀察窗(chuang) | 因為盒子尺寸 |
過濾 琥(hu)珀丙烯酸
用戶(hu)界面
要使用凝膠電泳和(he)透照器(qi)模塊,請從主屏幕上選擇(ze)。
在屏幕(mu)頂部,可(ke)以(yi)打開和(he)關閉藍(lan)光透(tou)照器。選擇(ze)燈泡(pao)按(an)(an)鈕,然后(hou)按(an)(an)下橙色的(de)撥號盤來開關透(tou)照器。
警告:當(dang)透照(zhao)器開啟時,不要(yao)長時間直視藍光。
光強也可以通過按住點擊向下和旋轉(zhuan)來(lai)調節
要設置凝膠的電壓,先選擇電壓按(an)鈕。向下推橙(cheng)色點擊輪(lun),并保持按(an)住(zhu)它,同時旋轉(zhuan)它來改變值(zhi)。順時針(zhen)撥可增(zeng)加電壓,逆(ni)時針(zhen)撥可降低(di)電壓。
要(yao)在選定(ding)的電壓(ya)下(xia)開始運(yun)行凝膠,請按(an)定(ding)時(shi)(shi)(shi)器(qi)按(an)鈕。在下(xia)一個屏幕上,設置(zhi)計時(shi)(shi)(shi)器(qi)。要(yao)更改(gai)持(chi)續時(shi)(shi)(shi)間(jian),請向下(xia)推橙色的點擊輪,并保(bao)持(chi)按(an)住它,同(tong)時(shi)(shi)(shi)旋轉它來(lai)更改(gai)值。順(shun)時(shi)(shi)(shi)針(zhen)撥增加持(chi)續時(shi)(shi)(shi)間(jian),逆(ni)時(shi)(shi)(shi)針(zhen)撥減少(shao)持(chi)續時(shi)(shi)(shi)間(jian)。
在(zai)按下(xia)確認鍵(jian)之(zhi)前(qian),確保你的(de)凝膠準備好并連接到(dao)便(bian)當實(shi)驗室。
如果Bento Lab沒(mei)有檢(jian)測到當前繪圖,或者當前繪圖過(guo)高,將(jiang)顯(xian)示錯誤消息(xi)。如果沒(mei)有檢(jian)測到電流,盡(jin)管連接了(le)凝膠盒,這可能意(yi)味著鉑絲斷(duan)了(le)。
凝膠(jiao)正在(zai)運行時(shi),剩(sheng)余時(shi)間顯示在(zai)右上(shang)角(jiao)位(wei)置(1),和一個(ge)閃爍的閃電(dian)表明電(dian)流流動(2)。(3)允許定時(shi)器時(shi)鐘按鈕調(diao)整和取消按鈕(4)可用(yong)于凝膠(jiao)關掉電(dian)源。
鑄造一(yi)種凝(ning)膠
1.測量了瓊(qiong)脂糖。對于1%的凝膠,使用0.5 g和50 mL的緩沖液。
2.將(jiang)瓊(qiong)脂糖粉與50毫升0.5x TBE緩沖液(ye)在微(wei)波燒瓶中混合。
3.一旦瓊(qiong)脂(zhi)糖溶解,在微(wei)波爐(lu)中(zhong)以大(da)功率(lv)加熱(re)20-30秒。在兩次爆發之間將(jiang)溶液旋轉混(hun)合,直到瓊(qiong)脂(zhi)糖*溶解。避免過(guo)度煮(zhu)沸混(hun)合物,因為緩沖液會(hui)蒸發,后(hou)你會(hui)得到高濃度的瓊(qiong)脂(zhi)糖。
4.檢查(cha)你(ni)的工作是在一個水平的表面鑄(zhu)造(zao)凝膠與均勻的厚(hou)度。
5.輕(qing)輕(qing)地把橙色(se)的蓋(gai)子從凝(ning)膠(jiao)盒上滑下來。
6.將(jiang)電(dian)極(ji)置于水槽中,以(yi)覆蓋電(dian)極(ji)周圍的緩沖區域。
7.選(xuan)擇一把梳子(zi)(zi),將梳子(zi)(zi)插(cha)入梳子(zi)(zi)夾。
8.一旦(dan)瓊(qiong)脂糖冷卻到(dao)(dao)大約55°C,它應該會感(gan)到(dao)(dao)熱,但不(bu)是太熱,觸(chu)摸-加入(ru)你的(de)DNA染色,并將(jiang)融化的(de)凝膠(jiao)倒入(ru)凝膠(jiao)罐。
9.讓凝(ning)膠冷卻(que)并凝(ning)固。這(zhe)在(zai)室溫下需要30分(fen)(fen)鐘(zhong),在(zai)涼爽(shuang)的房間或冰(bing)箱里需要15分(fen)(fen)鐘(zhong)。
10.輕輕地從凝膠中取出(chu)梳子,準備讓凝膠流動。
對電泳緩沖
我應(ying)該使用什么緩沖?
實驗室包含一個小(xiao)型凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)電(dian)(dian)泳系統,因此比較(jiao)(jiao)大(da)的(de)(de)凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)系統有更高的(de)(de)電(dian)(dian)壓梯度。電(dian)(dian)泳緩沖(chong)液(ye)中含有離(li)子(zi),這(zhe)些離(li)子(zi)傳(chuan)遞電(dian)(dian)荷(he)來分(fen)離(li)DNA段。較(jiao)(jiao)高濃度的(de)(de)緩沖(chong)液(ye)傳(chuan)輸(shu)更多(duo)電(dian)(dian)荷(he),這(zhe)對大(da)型凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)體(ti)系很有用。對于(yu)小(xiao)型凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)體(ti)系,較(jiao)(jiao)低濃度的(de)(de)緩沖(chong)液(ye)可以使條帶的(de)(de)分(fen)辨(bian)率更好。為(wei)了獲得(de)效(xiao)果,我們建議使用0.5x TBE的(de)(de)50V凝(ning)(ning)膠(jiao)(jiao)。
此種緩沖液
TBE緩沖液(ye)(ye)通常是5倍濃(nong)縮的原(yuan)液(ye)(ye)。0.5x TBE緩沖液(ye)(ye)的工作溶(rong)液(ye)(ye)為45mm和1mm EDTA。
準備5X的(de)原液,在1 L H2O中(zhong)加入以(yi)下物(wu)質:
· 54 g of Tris base
· 27.5 g of Boric acid
· 20 mL of 0.5 M EDTA (pH 8)
瓊脂糖(tang)的比例(li)
我應該使用多少比例的瓊脂糖?
DNA可以(yi)通過不同濃度的(de)(de)瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)(tang)凝膠(jiao)(jiao)的(de)(de)大(da)小(xiao)(xiao)來分辨。瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)(tang)的(de)(de)比例越(yue)大(da),可分解的(de)(de)DNA段越(yue)小(xiao)(xiao)。合適的(de)(de)瓊(qiong)脂(zhi)糖(tang)(tang)凝膠(jiao)(jiao)比例取決于(yu)DNA 段的(de)(de)大(da)小(xiao)(xiao)
DNA Size Resolution | Percent Agarose Gel | Weight Agarose |
1-30 kb | 0.5% | 0.5g per 100mL |
800 bp - 12 kb | 0.7% | 0.7g per 100mL |
500 bp - 10 kb | 1.0% | 1g per 100mL |
400 bp - 7 kb | 1.2% | 0.6g per 50mL |
200 bp - 3 kb | 1.5% | 0.75g per 50mL |
50 bp - 2 kb | 2.0% | 1g per 50mL |
凝膠成像運行
Bento Lab包含一個小型(xing)凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳系(xi)統(tong),因此比較(jiao)大的(de)凝(ning)膠(jiao)系(xi)統(tong)有更高的(de)電(dian)壓梯度(du),因為用(yong)來確定(ding)電(dian)壓梯度(du)的(de)距(ju)離是電(dian)極之間的(de)距(ju)離,而(er)不是凝(ning)膠(jiao)的(de)長(chang)度(du)。如果電(dian)壓過高,你可能會(hui)觀察到(dao)條(tiao)帶條(tiao)紋。為了獲得效(xiao)果,我們建議(yi)使用(yong)0.5x TBE的(de)50V凝(ning)膠(jiao)。
1.準備(bei)正在(zai)運行(xing)的緩(huan)沖區(qu)或使用預先準備(bei)好的緩(huan)沖區(qu)
2.將緩沖液(ye)倒入電泳槽中,置于準備(bei)好的凝膠上
液(ye)體覆蓋您的凝膠(jiao),水平約2-3毫米(mi)以(yi)上的凝膠(jiao)。
3. 小(xiao)心地把(ba)分(fen)子量梯裝進凝膠的通道(dao)。
4.將樣(yang)品裝入(ru)凝膠的(de)剩余孔中。
5.輕輕地把橙(cheng)色的蓋子滑到凝(ning)膠罐上(shang),直到它咔噠(da)一聲合上(shang)。
6.為(wei)您的協議設(she)置所需(xu)的電泳(yong)電壓。為(wei)了(le)使(shi)
改變電壓(ya),選擇電壓(ya)值按鈕。向下推
點擊-車輪和按(an)住(zhu),同時旋轉,以(yi)改變的(de)價值(zhi)。按(an)順時針方向撥(bo)(bo)增加電壓,逆時針方向撥(bo)(bo)減少電壓。一旦你達到了(le)想要的(de)電壓,釋放橙色的(de)點擊輪。
7.通過選擇時間值,向下推和旋轉橙色點擊輪(lun)來設置所需的時間。
8.點擊(ji)右邊(bian)的勾來確認(ren)你的設(she)(she)置,然后設(she)(she)置凝(ning)膠(jiao)開始運行。
9.運(yun)行凝膠,直到染(ran)料線移動到凝膠長(chang)度的75%左(zuo)右(you)。Bento Lab的典型(xing)運(yun)行時間大約是30-45分鐘,這(zhe)取(qu)決于凝膠濃(nong)度和(he)電壓。
10.等待運(yun)(yun)行(xing)完(wan)成,或者(zhe)取消運(yun)(yun)行(xing)。將電極與(yu)電源斷開,然后小心地將凝膠(jiao)從凝膠(jiao)盒中取出。
11.把(ba)你(ni)的凝膠放在透照器上,然后選擇透照器按(an)鈕,打(da)開(kai)藍光(guang),使其清晰可見。
第5章- PCR熱循環(huan)/加熱塊
本用戶指南包含充分利用Bento實驗室的(de)熱循環和熱阻(zu)模塊所(suo)需的(de)所(suo)有信息,包括創建和存儲新的(de)協(xie)議。
組(zu)件和物(wu)理布局
熱(re)(re)循環模塊位于便當實驗室系統的(de)(de)右側。熱(re)(re)循環塊(1)適用于具(ju)有(you)4×8排列的(de)(de)平頂或圓帽的(de)(de)0.2 mL管(guan)。可(ke)以安裝條(tiao)形管(guan)。熱蓋(2)被彈起并自動調整以適合管。風扇是用來(lai)通(tong)過空氣(qi)把熱量(liang)從(cong)系(xi)統(tong)中轉(zhuan)移(yi)出去的
右側(ce)的通(tong)風口(3)。確(que)保沒有物體(ti)阻礙(ai)空氣(qi)流動,防(fang)止過熱
安全(quan)提示:指示燈(4)表示系統處(chu)于活(huo)動(dong)狀(zhuang)態或(huo)仍然處(chu)于熱狀(zhuang)態。
當(dang)燈亮(liang)著的時候(hou)(hou),打開蓋(gai)子(zi)的時候(hou)(hou)要格(ge)外小心,因為像熱阻或熱(re)蓋可能會很熱。
Thermocycler規范
能力 | 32×0.2mL管 |
熱(re)循環系統 | 珀爾帖效應溫(wen)度控制, |
主(zhu)動冷(leng)卻(que) | |
溫度范圍 | 15°C - 99°C |
熱蓋 120°C /室溫 (off)
開始
實驗室(shi)的(de)熱循環模塊已經準(zhun)備好可(ke)以使(shi)用了,不需要任何額外的(de)設備或軟件。一切(qie)都可(ke)以編程(cheng)和配置直(zhi)接從船(chuan)上(shang)的(de)圖(tu)形界面使(shi)用Bento實驗室(shi)的(de)直(zhi)觀點擊(ji)輪按(an)鈕。
先,打(da)開(kai)實(shi)驗室(shi)使用后面(mian)的電源開(kai)關。過了一(yi)會(hui)兒,實(shi)驗室(shi)狀態屏幕出現了,顯(xian)示三個(ge)模(mo)塊圖標(biao)(左:凝(ning)膠(jiao)電泳,ter:離心機,右:熱循環)。點擊
熱(re)循環(huan)圖標激活模(mo)塊。這打開了熱(re)循環(huan)屏(ping)幕。
熱(re)循環屏幕(mu)(mu)在屏幕(mu)(mu)的(de)上半(ban)部分顯示(shi)關于模塊當前狀態的(de)狀態信息,例如模塊和(he)蓋子(zi)的(de)溫度。當模塊運行協議時(shi),剩余(yu)的(de)時(shi)間(jian)估計(ji)也會顯示(shi)出來。
加載樣品
在裝入樣(yang)品(pin)前,確保模塊的熱指示燈會熄滅。這意味著蓋子可以安全打(da)開,沒有(you)發熱元件。
1.打開實驗室熱循環蓋子(zi)。蓋子(zi)很容易打開,幾乎沒有阻(zu)力(li)。
2.將PCR管(guan)(0.2mL)裝入(ru)細胞塊(kuai)。多(duo)可裝載32管(guan)。如果使用加熱的(de)(de)(de)蓋子(zi),則(ze)確(que)保(bao)所(suo)有(you)PCR管(guan)的(de)(de)(de)高度相(xiang)同,以(yi)便在蓋子(zi)閉合時加熱的(de)(de)(de)蓋子(zi)均勻地應用。確(que)保(bao)熱循環(huan)塊(kuai)是清潔(jie)的(de)(de)(de),沒有(you)灰塵(chen)或其他(ta)元素阻止塊(kuai)和管(guan)道之間(jian)的(de)(de)(de)接(jie)觸。確(que)保(bao)PCR管(guan)牢固(gu)地固(gu)定在盒內。
3.蓋(gai)上蓋(gai)子,并確(que)保它是充(chong)分參與(yu)。
創建、編輯、存儲和運行(xing)協議
可以(yi)(yi)直接在實驗室上創建和編輯便當實驗室熱循環器的協議,而(er)不需要外部設(she)備。可以(yi)(yi)對協議進行命名和存儲,以(yi)(yi)供以(yi)(yi)后重用。
創建新協議(yi)
要(yao)創建一(yi)個新的協(xie)議(yi),先從熱(re)循環菜單中(zhong)選擇默認的PCR協(xie)議(yi)。這將(jiang)打開預裝有(you)默認設置的編(bian)輯器。或者,當使(shi)用(yong)Bento Lab熱(re)循環器作為熱(re)塊時,可以使(shi)用(yong)一(yi)個方(fang)便的默認協(xie)議(yi),該(gai)協(xie)議(yi)只包(bao)含一(yi)個溫階。
屏(ping)幕顯示了協議的(de)圖形表(biao)示。在(zai)屏(ping)幕的(de)右下角,可以看到(dao)幾(ji)個按鈕。初,有三種(zhong)選擇:
帶有(you)扳手(shou)圖標(1)的(de)左按鈕(niu)(niu)解鎖用于編輯的(de)協(xie)議。帶有(you)磁(ci)盤圖標(2)的(de)中(zhong)間按鈕(niu)(niu)提供了命名和存儲(chu)協(xie)議的(de)選項。帶有(you)start圖標(3)的(de)右(you)按鈕(niu)(niu)將激活模(mo)塊并開始運行協(xie)議。
編輯(ji)一個(ge)協議
在(zai)默認協議視(shi)圖(tu)(tu)中(zhong),單擊生(sheng)成圖(tu)(tu)標(biao)。
右下角的三個(ge)(ge)按鈕消失了。相反,突出顯示了一個(ge)(ge)溫階(jie),下(xia)面顯示了該階段的屬性(xing)。使用橙色的點擊輪(lun),您現在可以滾(gun)動協議中的每(mei)個階段。屏幕底部(bu)的詳細屬性(xing)也隨之(zhi)改變。
要返回到(dao)默認協議(yi)視圖以(yi)保存更改或運行協議(yi),請(qing)按(an)下綠色的(de)back按(an)鈕。
對溫度級(ji)進行(xing)改變
1.通過滾動橙色的單(dan)擊輪來(lai)突出(chu)顯(xian)示要(yao)更改(gai)的溫階。
2.向下推橙(cheng)色(se)的點擊輪。現在選擇(ze)了溫(wen)階,屬性是可編輯的。
3.要更改溫(wen)度,請選擇“溫(wen)度值"按(an)(an)鈕。向下(xia)推(tui)橙色點擊輪,并保持按(an)(an)住它,同(tong)時旋轉它來(lai)改變值。順時針撥,以增加溫(wen)度,和
逆時針方向減小(xiao)。一旦你達到了(le)想要的溫度,釋放(fang)橙色(se)的點擊輪(lun)。
4.要更改持(chi)(chi)續(xu)時(shi)間(jian),請選擇“持(chi)(chi)續(xu)時(shi)間(jian)值"按(an)鈕,并按(an)照與(yu)溫(wen)度相(xiang)同的方式更改該值。
5.完成之(zhi)后,單擊右側的確(que)認按鈕來確(que)認您(nin)的更改(gai)。屬性再次被(bei)鎖定(ding)。
6.如(ru)果不希望保(bao)留更改(gai),也(ye)可以使(shi)用綠色的back按鈕。在這種情(qing)況下,屬性也(ye)再次被鎖定,但不保(bao)留更改(gai)。
對循環進行更改
1.通過用(yong)橙色的(de)單(dan)擊輪滾動(dong)到它,突出顯示您想(xiang)要更改(gai)的(de)周期。
2.向下推橙色的點擊輪。循環現在被選中,屬(shu)性(xing)是可編輯的。
3.要(yao)更改重復次(ci)數(shu)(shu),請選擇屏幕底(di)部的循(xun)環(huan)(huan)重復值按鈕(niu)。向(xiang)下(xia)推橙色點擊輪(lun),并保持按住它,同時(shi)旋轉它來改變值。順(shun)時(shi)針撥可(ke)增加循(xun)環(huan)(huan)次(ci)數(shu)(shu),逆時(shi)針撥可(ke)減少循(xun)環(huan)(huan)次(ci)數(shu)(shu)。一旦設置了所需的周期數(shu)(shu),就可(ke)以(yi)釋放橙色的點擊輪(lun)。
4.要(yao)更改循(xun)環的起始點(dian)和結(jie)束(shu)點(dian),循(xun)環的左右兩側將顯示具(ju)有(you)左右圖標的按鈕。
5.要更改循環的(de)起(qi)始(shi)點(dian),請突出顯示循環左側的(de)按鈕。向下推橙(cheng)色點(dian)擊(ji)輪,并保持按住(zhu)它(ta),同時(shi)(shi)旋(xuan)轉它(ta)。撥盤逆時(shi)(shi)針(zhen)移動(dong)周期(qi)的(de)起(qi)始(shi)點(dian)向左,或順時(shi)(shi)針(zhen)移動(dong)周期(qi)的(de)起(qi)始(shi)點(dian)向右。
6.周期的終點也可以類似地(di)改變。7.如果后一個(ge)階段是持有階段,則不能包含在一個(ge)循(xun)環中。
8.完成之后(hou),單(dan)擊右(you)側(ce)的確(que)認按鈕來(lai)確(que)認您的更改。屬性再次被鎖定。
9.如果不希望保留(liu)更改,也可以使用綠色的back按(an)鈕(niu)。在這種情況下,屬性也再次被(bei)鎖定,但(dan)不保留(liu)更改。
添加和刪除溫度階段
1.要添加一個(ge)溫階,請在(zai)新階段(duan)的位置旁(pang)邊選擇(ze)一個(ge)溫度階段(duan)。
2.向下(xia)推橙色的點擊(ji)輪。
3.通過單擊舞臺(tai)兩(liang)側(ce)(ce)帶有(you)加號圖標的按鈕,可以將(jiang)新(xin)舞臺(tai)添(tian)加到所(suo)選舞臺(tai)的左(zuo)側(ce)(ce)或右側(ce)(ce)。
4.一(yi)旦(dan)點擊了加(jia)號,就會在(zai)選中的(de)一(yi)側添加(jia)一(yi)個新(xin)舞臺(tai)。新(xin)階段具有與其鄰居(ju)相(xiang)同(tong)的(de)屬性,該鄰居(ju)被選中來添加(jia)階段。
5.將(jiang)自動選擇要編輯的(de)新階段。
6.要刪除(chu)一(yi)(yi)個(ge)階段(duan),單擊左下角帶有bin圖標的(de)按鈕(niu)。如果該階段(duan)是一(yi)(yi)個(ge)循環中僅存的(de)階段(duan),則該循環也將被刪除(chu)。
配置加熱的(de)蓋子
1.要(yao)配(pei)置加熱蓋的溫度,請選擇編(bian)輯器右上角(jiao)的cog圖(tu)標(biao)。
2.向下推(tui)橙色的點擊輪(lun)。
3.蓋子的(de)(de)溫度現(xian)在可以編輯。它(ta)可以以類似于編輯器(qi)中任(ren)何溫度階段的(de)(de)溫度的(de)(de)方式進行調優。
4.另外,通(tong)過(guo)按(an)下溫度(du)值按(an)鈕(niu),加熱的蓋(gai)子可以*關閉和打開。
5.要確(que)認(ren)您的(de)更改,請單擊右側的(de)確(que)認(ren)按鈕。屬性再次被鎖定(ding)。
6.如果(guo)不希(xi)望保留更改(gai)(gai),也可以(yi)使用綠色的(de)back按鈕(niu)。在這種情況下,屬性也再次被(bei)鎖定,但(dan)不保留更改(gai)(gai)。
第六章:安全與實(shi)踐
安(an)全和實(shi)踐
便當(dang)實驗(yan)室用戶(hu)手冊的基本安全建(jian)議章節。安全標志說(shuo)明(ming)、維護說(shuo)明(ming)、技術規(gui)范和警告。
安全警告
始(shi)終(zhong)遵守以下安全預(yu)防(fang)措施
只連接一個(ge)接地的(de)電(dian)源(yuan)插座。電(dian)源(yuan)適配(pei)器為一級(ji)結構,必須(xu)接地!
這種(zhong)設備(bei)只適合(he)在溫和的氣(qi)候條件(jian)下使用。切勿在潮濕或潮濕的環境下使用設備(bei)。
避免過(guo)熱、潮濕、灰(hui)塵和振(zhen)動。
始終(zhong)使(shi)用電源提(ti)供的(de)鉛。
確(que)保液體不從通風處(chu)進入(ru)。
維護
只能用(yong)濕布清洗
· 不要(yao)潮濕或(huo)讓濕氣滲入(ru)本機
·不要使(shi)用溶(rong)劑
·
產品(pin)符合(he)IEC/EN 61010-1標準,可進行閃蒸試驗。電(dian)源適配器可以安裝(zhuang)射頻干擾抑制器。因(yin)此,建議只進行直流測試。
技(ji)術(shu)規(gui)范(fan)
該設備為(wei)(wei)室(shi)內使(shi)用,在環境溫度(du)范圍為(wei)(wei)10 ~ 35°C,大相對濕度(du)為(wei)(wei)80%的情況(kuang)下(xia),可滿足(zu)其性能(neng)指(zhi)標,在環境溫度(du)為(wei)(wei)40°C的情況(kuang)下(xia)使(shi)用是安(an)全的。
設備在(zai)海(hai)拔2000米以下的地方,按照IEC 664的II類(瞬(shun)態(tai)電壓)和污染程度進行(xing)操作(zuo)。尺寸:329 mm * 214 mm * 81.5 mm
重(zhong)量:2.5公斤
電源輸入:100-240V~2., 50/ 60hz
電源(yuan)輸出:15VDC, 9.6A
只(zhi)能與認可的配件一起使用